Practica 2.

Mesa # 4.
4L2m.
[Medios de cultivo]
(AGAR MIO)..
Practica 2….
*Dr. Víctor Manuel Alfaro López.
26-04-10.






Practica #2.
[Medios de Cultivo]
.
.
.
V
Agar Mio.
(Medio movilidad-indol-ornitina)

[Objetivo]*
Realizar Medio de Cultivo (Agar MIO).
Para poder realizar el medio mio es necesario conocer como se integra, las indicaciones y como realizaremos el medio además cuanto tiempo se tiene que centrifugar etc.
Consta de:
Peptona de Gelatina 10.0 L-Ornitina 5.0
Peptona de Caseína 10.0 Dextrosa 1.0
Extracto de Levadura 3.0 Púrpura de Bromocresol 2.0
Agar Bacteriológico 2.0
pH 6.5 ± 0.2

Método:
Suspender 31 g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitación suave hasta su completa
disolución y hervir durante un minuto. Dispensar en tubos de vidrio, tapar y esterilizar en autoclave a
121°C (15 libras de presión) durante 15 minutos. Dejar enfriar en posición vertical.

[INTRODUCCION]*
El Medio MIO es utilizado para la diferenciación de enterobacterias en base a su movilidad, capacidad para
descarboxilar la lisina y la producción de indol. Este medio también es conocido como Medio para
Movilidad Indol y Ornitina.
En este medio las peptonas proporcionan la fuente de carbono y nitrógeno. El extracto de levadura provee
las vitaminas y cofactores requeridos para el desarrollo. La dextrosa proporciona la fuente de energía. El
agar es adicionado para demostrar la movilidad. El púrpura de bromocresol actúa como indicador de
cambios de pH facilitando la detección de la descarboxilación de la lisina.

[MATERIALES]*
*Gasas.
*Algodón.
*Papel secante.
*Espatula.
*(18) Tubos de ensayo.
*Vidrio de reloj.
*balanza granataria.
*Agitador de cristal.
*Matraz Erlenmeyer 500 ml.
*Probeta.
*Vaso de precipitado.
*Tape testigo.
*tape.
*Papel esterilizado.
*Guante asbesto.
*Gas L.P.
*(2) Mecheros de Bunsen.
*Autoclave.
*Maquina para esterilizar Tubos.
*agua destilada.
*Agar MIO.

[TECNICA DE ESTERILIZACION]*
121 grados centígrados (15 lbs. de presión), durante 15 minutos.

[PROCEDIMIENTO]*
1. Equipo de bioseguridad (bata, guantes, cubre bocas, gorro).
2. Colocar el campo de esterilización.
3. Colocar materiales que vallamos a utilizar.
4. Pesar el vidrio de reloj (14.6 gr) y después el medio de cultivo (11.16 gr.) el medio de cultivo en este caso agar MIO lo pasamos al matraz erlenmeyer con ayuda de un embudo para evitar que se tire el polvo y mezclamos con 360 ml de agua destilada que se encuentra en el matraz erlenmeyer.
5. Mezclamos con el agitador de cristal hasta que diluya y no se encuentren grumos.
6. Calentamos a punto de ebullición con el mechero de bunsen.
7. Dejamos reposar 15 minutos.
8. Colocar y taponear con torundas de algodón y gasa, etiquetamos (mesa, grupo, fecha, medio) y colocamos un pedazo de tape testigo.
9. Colocar en autoclave a 121 grados centígrados (15 lbs. De presión durante 15 min. )
10. Dejamos enfriar un poco.
11. Bacear a tubos de ensayo que anteriormente esterilizamos en la maquina.
12. Bacear 10 ml de medio a cada tubo, colocamos algodón en la parte superior del tubo para evitar que se tire el liquido, etiquetamos los tubos y colocamos en un vaso de precipitado.

P.D.[ al etiquetar debe de tener nombre, grupo, fecha, mesa, medio]

[CONCLUSION]*
Aprendimos que a pesar que cometemos errores hablando y leyendo aprendemos y que no debemos hacer las cosas atrabancándonos o aferrando, tenemos que tener cuidado y no adelantarnos a la forma que queremos, mas vale tardar un poco más que hacer las cosas mal.
Y también aprendimos que Edered y Clark así como Oberhofer y Hajkowsky desarrollaron el Medio MIO para poder observar las
reacciones de movilidad, producción de indol y descarboxilación de la lisina simultáneamente. Estas
reacciones son determinantes para la identificación de enterobacterias.